دسته بندی | پژوهش ها |
بازدید ها | 3 |
فرمت فایل | docx |
حجم فایل | 822 کیلو بایت |
تعداد صفحات فایل | 27 |
چکیده
خلاصه
پلی اتیلن گلیکول (PEG) میتواند تراریختی ژنتیکی را در باکتری (اشرشیاکلی) و مخمر (Saccharomyces cerevisiae) بدون حذف دیواره سلولی، القا کند. تراریختی با واسطه PEG اشرشیا کلی از لحاظ فنی ساده است و بازده تراریختی با بهره وری میکروگرم در DNA وجود دارد. تجزیه و تحلیل دقیق از پارامترهای دخیل در تراریختی با واسطه PEG از اشرشیا کلی تفاوت اساسی بین PEG و روش استاندارد CaCI2 برای تراریختی اشرشیا کلی را نشان میدهد. تراریختی با واسطه PEG مخمر به مراتب سادهتر از روش پروتوپلاست موجود و قابل مقایسه از نظر بهرهوری است. روش های جدید برای تراریختی ژنتیکی با واسطه PEG که در اینجا شرح داده شده، ممکن است ابزار کلی را در انجام تراریختی ژنتیکی در یک طیف گستردهای از موجودات زنده به اثبات برساند.
SUMMARY
Polyethylene glycol (PEG) can induce genetic transformation in both bacteria (Escherichia coli) and yeast (Saccharomyces cerevisiae) without cell wall removal. PEG-mediated transformation of E. coil is technically simple and yields transformants with an efficiency of 106--107 transformants/pg DNA. Detailed analysis of the parameters involved in PEG-mediated transformation of E. cell reveals basic differences between the PEG and standard CaCI2 methods for transformation of E. colt. PEG-mediated transformation of yeast is far simpler than existing protoplast methods and is comparable in efficiency. The new methods described here for PEG-mediated genetic transformation may prove to be of general utility in performing genetic transformation in a wide variety of organisms.